Eucast dokumenty

• plotny pro vyšetření citlivosti diskovou difúzní metodou (MH, MH-F) se inokulují 100 – 150 μl neředěného bujónu přímo z pozitivní hemokultivační lahvičky (validovány jsou lahvičky pro hemokultivaci BD, bioMerieux a Thermo Fisher);
• plotny se inokulují stejně jako u standardní diskové difúzní metody EUCAST bez jakékoli centrifugace nebo ředění inokula;
• inkubace se zkracuje na 4, 6 a 8 hodin s breakpointy přizpůsobenými každému z časů inkubace; od 12. dubna 2022 lze prodloužit inkubaci nejdéle na 16-20 hodin;
• průměry zón se odečítají z horní strany plotny po sejmutí víčka;
• breakpointy jsou upraveny pro každý druh a pro každý čas odečítání;
• před interpretací výsledků vyšetření citlivosti musí být identifikován druh vyšetřovaného mikroba;
• metoda je v současné době validována pro následující druhy:
  • Escherichia coli
  • Klebsiella pneumoniae
  • Pseudomonas aeruginosa
  • Acinetobacter baumannii
  • Staphylococcus aureus
  • Streptococcus pneumoniae
  • Enterococcus faecalis a Enterococcus faecium
• po pozitivním signálu by hemokultivační lahvička měla být zpracována v rozmezí 0 – 18 hodin;
• každý druh má vlastní RAST breakpointy a vlastní čas k odečítání (4, 6, 8 a 16-20 hodin);
• po 4 hodinách nelze odečítat některé průměry zón. Odečítání se opakuje po 6 a 8 nebo podle potřeby nově i po 16-20 hodinách;
• průměry zón lze odečítat POUZE tehdy, je-li zřetelný okraj zóny – jinak se plotny reinkubují a odečítají po 6, 8 nebo 16-20 hodinách;
• tabulka breakpointů je specifická pro RAST EUCAST – nelze používat obvyklé Tabulky breakpointů EUCAST a rychlou metodu vyšetření citlivosti nelze používat s inokulem připraveným z kolonií;
• průměry zón, které byly úspěšně odečteny a interpretovány v jednom z alternativních inkubačních časů by se neměly odečítat znovu.

 Kalibrace a validace RAST

• Vývojová laboratoř EUCAST zveřejňuje základní údaje o vztahu mezi průměry zón, hodnotami MIC a ATU baseline data on the relationship between zone diameters, MIC-values and ATUs.

Zavádění RAST z hemokultivačních lahviček

• pokud jste zavedli nebo máte-li v úmyslu zavést RAST podle metody EUCAST, pošlete nám e-mail s uvedením názvu, města a země vaší laboratoře a sdělte nám, zda jste byli úspěšní nebo se setkali s problémy. Kontaktujte EUCAST prostřednictvím kontaktního formuláře subject related contact form.

EUCAST validoval diskovou difúzní metodu přímé inokulace ploten s MH a MH-F a odečítáním po 4, 6, 8 a 16-20 hodinách inkubace.

Kritéria kontroly kvality pro EUCAST RAST, v5.0 (aktualizace duben 2022)
(Rychlé vyšetření citlivosti přímo z pozitivních hemokultivačních lahviček EUCAST) jsou nyní v samostatném dokumentu a již nejsou již součástí tabulky breakpointů RAST.

Screening ESBL a karbapenemáz u E. coli a K. pneumoniae pro epidemiologické účely jako součást procedury RAST:

Některé mechanismy rezistence vyžadují pro citlivou detekci jiné než klinické breakpointy. EUCAST doporučuje screening na řadu mechanismů rezistence pro účely epidemiologie a kontroly infekcí (viz samostatný dokument).

EUCAST validoval samostatné screeningové epidemiologické předěly (cut-offs) pro detekci ESBL nebo karbapenemáz u E. coli a K. pneumoniae.

Viz soubor EUCAST Screening mechanismů R-RAST-v 2.0. (duben 2022)

RAST – Často kladené otázky v 2.0 (duben 2022)